DB21T 1687一2008 生鮮肉中三聚氰胺的測(cè)定
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- DB21T 1687-2008 生鮮肉中三聚氰胺的測(cè)定1.1.1 明書）。
1.1.2 異辛烷（C8H18）
1.1.3 三氯甲烷（CHCl3）
1.1.4 異辛烷+三氯甲烷混合液：準(zhǔn)確量取40ml異辛烷（4.2.3）和60ml三氯甲烷(4.2.4),混勻即得。
1.1.5 10%甲醇/20mMPBS：稱取0.62gNaH2PO4•H2O，5.73gNa2HPO4•12H2O和9gNaCl用蒸餾水溶解，并定容至1000mL，取此溶液900mL，加入100mL甲醇混勻即得。
1.2 儀器和設(shè)備
1.2.1 酶標(biāo)儀（帶450nm濾光片）。
1.2.2 渦旋混合器。
1.2.3 冷凍離心機(jī)。
1.2.4 微量加樣器：20μL、50μL、100μL、150μL、250μL。
1.2.5 恒溫干燥箱。
1.2.6 分析天平：感量0.01g。
1.2.7 振蕩器
4.3.8 絞肉機(jī)
4.3.9 勻漿機(jī)
1.3 測(cè)定步驟
1.3.1 樣品處理
準(zhǔn)確稱量2g試料（3.1）精確到0.01g，加入10mL 10%甲醇/20mMPBS（4.2.6），渦旋30s，振蕩5min，4000r/min離心5min，取2mL上清液加入2mL異辛烷+三氯甲烷混合液（4.2.5），混勻，4000r/min離心5min，靜置，取上層150μL待測(cè)。
1.3.2 測(cè)試程序
取出欲測(cè)數(shù)量的微孔條安插在酶標(biāo)板上，分別吸取0μg/L、20μg/L、100μg/L、250μg/L、500μg/L標(biāo)準(zhǔn)溶液（4.2.2）和試樣萃取液（4.4.1）各150μL至包被有三聚氰胺抗體的對(duì)應(yīng)微孔中，分別加入50μL三聚氰胺酶標(biāo)記物溶液，振蕩使混勻，25℃左右孵育30min。傾盡酶標(biāo)板，清洗液（4.2.2）洗板4次，拍干。加100μL底物（4.2.2）至每個(gè)微孔中，振蕩使混勻，25℃左右孵育30min。加100μL終止液（4.2.2）至每個(gè)微孔中，振蕩混勻，450nm下讀取各微孔吸光度值。
注：不同品牌的試劑盒其操作步驟可能略有差異，比如稀釋倍數(shù)，具體操作步驟可根據(jù)試劑盒使用說明書略作調(diào)整。
試劑盒使用前恢復(fù)到室溫。
標(biāo)準(zhǔn)和樣品做平行試驗(yàn)以增加準(zhǔn)確性。
1.4 結(jié)果計(jì)算
以空白溶液（濃度為0的標(biāo)準(zhǔn)溶液）的吸光度值為100%作為計(jì)算基準(zhǔn)，折算出各標(biāo)準(zhǔn)溶液和試樣萃取液的相對(duì)吸光度值。
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